衢州市分子診斷試劑原材料優(yōu)質(zhì)
發(fā)布時間：2024-02-17 01:16:05
衢州市分子診斷試劑原材料優(yōu)質(zhì)
疫苗:是指用物理或化學方法將致病微生物殺死或致弱而制成的一種無致病性、有免疫原性的制劑，或者是直接提取致病微生物的免疫原性蛋白或編碼免疫蛋白的基因，利用分子生物學技術制成的具有免疫原性而無致病性的制劑。目前的疫苗有病毒(細菌)死苗、病毒(細菌)活苗、亞單位苗、基因工程苗等。血清型:是指微生物學中種以下的一種分 型。因為微生物在種內(nèi)有不同的抗原性，因此可分不同的抗原型或血清型。
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常規(guī)普通PCR常見問題：1. 優(yōu)化反應條件，梯度摸索退火溫度，延長退火延伸時間，增加反應循環(huán)數(shù)（30-45區(qū)間為宜）。2. 對核酸模板進行純化，或使用商業(yè)化核酸提取試劑盒進行提取，增加核酸模板的上樣量。3. 優(yōu)化反應體系（預混體系除外），改變檢測體系中的Mg2+濃度及dNTPs用量，更換體系中Buffer。4. 重新設計引物，避免引物二聚體和鏈內(nèi)二級結(jié)構(gòu)，在一次稀釋引物后可分裝成多支小管，減少反復凍融次數(shù)。
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在動物疫病診斷標準等技術規(guī)范中，酶聯(lián)免疫吸附試驗對試驗中加底物的反應步驟進行規(guī)定，規(guī)定固定的時間，然后加終止液。但是，在許多酶聯(lián)免疫吸附試驗中，加底物的反應步驟需要根據(jù)陰性、陽性對照反應情況對反應的時間進行調(diào)整。如當陰性與陽性對照的反應結(jié)果出現(xiàn)后，實驗人員則可以加終止液。有關資料規(guī)定的時間可能太長或者太短，這樣會對反應的結(jié)果產(chǎn)生影響。如果加底物的反應時間較長，樣品則有可能呈現(xiàn)陽性，易導致誤診情況的產(chǎn)生。
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動物疫病診斷的主要內(nèi)容有:一是對血、 尿、糞等進行臨床常規(guī)化驗;二是從流行病學角度，調(diào)查研究動物疫病流行情況，主要調(diào)查動物發(fā)病時間及地點、疫病蔓延情況、疫情來源及傳播的途徑與方式等;三是從病理學方面，剖檢因忠傳染病而死亡的畜禽尸體，查看其病理變化，或者取病料進行送檢，再進一步做病理組織學方面的診斷;四是從微生物學角度，檢查、堅定從患病的畜禽病料當中分離并且培養(yǎng)出來的病原微生物，或者是進行動物接種試驗等，五是從免疫學角度，對組織或者細胞的變態(tài)反應、細胞的免疫功能及血清學反應等進行診斷。
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分子診斷的主要技術有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應和生物芯片技術。1.核酸分子雜交技術 具有一定互補序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補配對原則締合成異質(zhì)雙鏈的過程，稱為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測核酸序列和探針序列。應用該技術可對特定DNA或RNA序列進行定性或定量檢測。2.聚合酶鏈反應（即Polymerase chain reaction，PCR）原理：PCR是模板DNA，引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸（dNTP）在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應，擴增出所需目的DNA。包括三個基本步驟：雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈（變性）；在低溫下引物與單鏈DNA互補配對（退火）；在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術是近年發(fā)展起來的分子生物學與微電子技術相結(jié)合的核酸分析檢測技術。起初的生物芯片技術主要目標是用于DNA序列測定、基因表達譜鑒定和基因突變體檢測和分析，所以又稱為DNA芯片或基因芯片技術。由于這一技術已擴展至免疫反應、受體結(jié)合等非核酸領域，出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細胞芯片、組織芯片等，所以改稱生物芯片技術更符合發(fā)展趨勢。