鐵嶺市實時熒光定量PCR儀研發(fā)
發(fā)布時間：2023-09-28 01:25:58
鐵嶺市實時熒光定量PCR儀研發(fā)
全球，雖然只有少數的芯片可用于臨床診斷，但國內基因芯片技術已經處于世界領 跑的地位?；蛐酒夹g將是熒光定量PCR 檢測技術具挑戰(zhàn)的潛在對手，主要是：熒光定量PCR 技術一次只能檢測一個或幾個目標基因，而基因芯片技術可以實現(xiàn)對大量目標基因的同時檢測。隨著人類基因組計劃的進展，基因芯片在國內外已成為研發(fā)熱點。若基因芯片技術迅速成熟并大規(guī)模產業(yè)化，將對熒光定量PCR 檢測產生較大的沖擊。不過，基因芯片的大規(guī)模臨床應用還存在尚未克服的技術缺陷，主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因，預計熒光定量PCR 檢測技術在今后5 到10 年內可保持前鋒。
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隨著對動物檢疫工作的發(fā)展與完善,僅依靠獸醫(yī)的經驗檢查已經不能滿足現(xiàn)今動物疫病診斷的需求,因此,病理化驗室開始發(fā)揮重要作用.如藍耳病的病原學檢測方式需要采集病豬的扁桃體,淋巴結,肺,肝,脾等,利用10%的中性福爾馬林進行固定,經過石蠟切片,HE染色之后使用光鏡對樣本進行病理學組織檢查得出結論,又如豬瘟的病理學檢查方式主要有免疫熒光實驗,酶聯(lián)免疫吸附實驗,核酸探針技術,基因芯片檢測技術等.
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動物疫病包括動物傳染病、寄生蟲病。動物傳染病，即由病原體侵入動物體內，使動物產生具有一定潛伏期和臨床癥狀并具有傳播性 的動物疫病，如口蹄疫、雞瘟、牛肺疫、炭疽、布魯氏菌病、狂 犬病等。動物寄生蟲病，即由寄生蟲寄生在動物體內或體表引起 的疾病，如豬囊蟲病、旋毛蟲病、鉤端螺旋體病、血吸蟲病、疥瞞等。根據動物疫病對養(yǎng)殖業(yè)生產和人體健康的危害程度，我國還 將動物疫病分為下列三類：對人畜危害嚴重、需要采取緊急、嚴 厲的強制預防、控制、撲滅措施的為一類疫?。豢稍斐芍卮蠼洕?損失、需要采取嚴格控制、撲滅措施，防止疫情擴散的為二類疫 ??；常見多發(fā)、可能造成重大經濟損失、需要控制和凈化的為三 類疫病。
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動物防疫動物疫病的預防、控制、撲滅及動物和動物產品的檢疫。狹義的動物防疫，是為了預防某種動物疫病，對所飼養(yǎng)的動物進行針對性地接種疫苗后，產生一種明顯針對該種疫病的免疫力，也就是通過打預防針而預防動物疫病的發(fā)生。疫病預防指采取一切手段將某種傳染病排除在一個未受感染動物群之外的防疫措施。通過多種隔離設施和檢疫措施阻止某種傳染病進入一個尚未被污染的地區(qū)；或通過免疫接種、藥物預防和環(huán)境控制等措施，保護動物免遭疫病危害。
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在PCR反應早期，產生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別，而后熒光的產生進入指數期、線性期和終的平臺期，因此可以在PCR反應處于指數期的某一點 上來檢測PCR產物的量，并且由此來推斷模板初的含量。為了便于對所檢測樣本進行比較，在real-time Q-PCR反應的指數期，首先需設定一定熒光信號的域值，一般這個域值（threshold）是以PCR反應的前15個循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號 （baseline），熒光域值的缺省設置是3～15個循環(huán)的熒光信號的標準偏差的10倍。如果檢測到熒光信號超過域值被認為是真 正的信號，它可用于定義 樣本的域值循環(huán)數（Ct）。Ct值的含義是：每個反應管內的熒光信號達到設定的域值時所經歷的循環(huán)數。研究表明，每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數的 對數存在線性關系，起始拷貝數越多，Ct值越小。利用已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線，因此只要獲得未知樣品的Ct值，即可從標準曲線上計算出該樣 品的起始拷貝數。