沈陽市熱啟動Taq酶優(yōu)質(zhì)
發(fā)布時間：2023-05-28 01:28:39
沈陽市熱啟動Taq酶優(yōu)質(zhì)
Taq酶的酶動力與擴增效率有關(guān)。一般熱啟動Taq酶的酶動力越強，PCR擴增的指數(shù)增長期越長，‘S型’曲線更加典型，熒光信號值更高，而且更適合做多重PCR檢測。我們曾比較過多家公司的熱啟動Taq酶，在國外品牌中，英國Bioline公司的熱啟動Taq酶，酶動力較好，可做4重PCR，等量起始模板CT30時的熒光信號值高。在國內(nèi)品牌中，BIOG熱啟動Taq酶的指數(shù)期較長，可做3重PCR，且擴增曲線的‘S’型不受影響，其它的國產(chǎn)品牌一般只能支持2重反應(yīng)，在做3重反應(yīng)時，擴增曲線低矮，熒光信號值較低，無典型擴增曲線，結(jié)果很難判定。
沈陽市熱啟動Taq酶優(yōu)質(zhì)
熱啟動Taq酶的產(chǎn)生：在PCR的反應(yīng)過程中，主要有三個階段：變性、復(fù)性、延伸。Taq DNA聚合酶的復(fù)性溫度是72℃，但其在低溫下也有活性（活性較弱），也能催化引物與模板復(fù)性，只是錯配率高，發(fā)生非特異性復(fù)性機率大。這樣在未達到72℃之前，反應(yīng)在Taq酶聚合下不斷擴增出非特異性產(chǎn)物，而使實驗失敗。在傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)中，這樣由低溫上升至高溫的過程中，引物錯配和二聚體的形成機率非常高，Hot Start Taq DNA聚合酶就是讓PCR反應(yīng)一開始就在大于70℃下進行。當(dāng)溫度較低時，酶活性被封閉，當(dāng)溫度大于一定溫度時酶又開始工作。這樣就避免了在低溫下復(fù)性、延伸的過程，消除引物錯配和二聚體形成，減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。我們是如何對Hotstart Taq酶修飾而讓它只在高溫下才能發(fā)揮活性？這就是Hot Start taq酶的作用原理。
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動物疫病包括動物傳染病、寄生蟲病。動物傳染病，即由病原體侵入動物體內(nèi)，使動物產(chǎn)生具有一定潛伏期和臨床癥狀并具有傳播性 的動物疫病，如口蹄疫、雞瘟、牛肺疫、炭疽、布魯氏菌病、狂 犬病等。動物寄生蟲病，即由寄生蟲寄生在動物體內(nèi)或體表引起 的疾病，如豬囊蟲病、旋毛蟲病、鉤端螺旋體病、血吸蟲病、疥瞞等。根據(jù)動物疫病對養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)和人體健康的危害程度，我國還 將動物疫病分為下列三類：對人畜危害嚴(yán)重、需要采取緊急、嚴(yán) 厲的強制預(yù)防、控制、撲滅措施的為一類疫??；可造成重大經(jīng)濟 損失、需要采取嚴(yán)格控制、撲滅措施，防止疫情擴散的為二類疫 ??；常見多發(fā)、可能造成重大經(jīng)濟損失、需要控制和凈化的為三 類疫病。
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動物防疫動物疫病的預(yù)防、控制、撲滅及動物和動物產(chǎn)品的檢疫。狹義的動物防疫，是為了預(yù)防某種動物疫病，對所飼養(yǎng)的動物進行針對性地接種疫苗后，產(chǎn)生一種明顯針對該種疫病的免疫力，也就是通過打預(yù)防針而預(yù)防動物疫病的發(fā)生。疫病預(yù)防指采取一切手段將某種傳染病排除在一個未受感染動物群之外的防疫措施。通過多種隔離設(shè)施和檢疫措施阻止某種傳染病進入一個尚未被污染的地區(qū)；或通過免疫接種、藥物預(yù)防和環(huán)境控制等措施，保護動物免遭疫病危害。
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Taq DNA聚合酶具有很高的加工合成特性，在適反應(yīng)溫度時，dNTP的摻入速度為35～100 nt/（s．酶分子），擴增長度可達7.6 kb。在低溫條件下，Taq DNA聚合酶的活性明顯降低，導(dǎo)致此酶在模板內(nèi)局部二級結(jié)構(gòu)區(qū)域的延伸能力受阻或前進速率常數(shù)與解離常數(shù)的比值發(fā)生改變。在較高的溫度（95℃以上）時，很少有DNA合成；在體外，DNA在較高溫度時的合成速度受到引物或引物鏈與模板鏈雙鏈結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的限制。由于Taq DNA聚合酶的適反應(yīng)溫度高達75～80℃，故退火溫度和延伸溫度均可適當(dāng)提高，這限制了非特異性擴增產(chǎn)物的出現(xiàn)，增加了PCR反應(yīng)的特異性。