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丹東市實時熒光定量PCR儀標準

發(fā)布時間:2023-05-07 01:29:09
丹東市實時熒光定量PCR儀標準

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常規(guī)普通PCR常見問題:1. 優(yōu)化反應條件,梯度摸索退火溫度,延長退火延伸時間,增加反應循環(huán)數(shù)(30-45區(qū)間為宜)。2. 對核酸模板進行純化,或使用商業(yè)化核酸提取試劑盒進行提取,增加核酸模板的上樣量。3. 優(yōu)化反應體系(預混體系除外),改變檢測體系中的Mg2+濃度及dNTPs用量,更換體系中Buffer。4. 重新設計引物,避免引物二聚體和鏈內(nèi)二級結構,在一次稀釋引物后可分裝成多支小管,減少反復凍融次數(shù)。

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常用的動物檢疫方法:常用的動物檢疫方法有臨床檢查、實驗室檢驗等方法。臨床檢查方法主要看動物的表現(xiàn)(靜、動、臥、起、立、精神、食欲等)是否正常,體溫、脈搏、呼吸等是否在正常生理指標范圍內(nèi)。實驗室檢驗則依照農(nóng)業(yè)部頒布的動物檢疫操作規(guī)程規(guī)定的檢疫方法和判定標準執(zhí)行。①產(chǎn)地檢疫。是指動物離開飼養(yǎng)產(chǎn)地之前的檢疫。②屠宰檢疫。是指在宰前、宰后及屠宰過程中,對動物及動物產(chǎn)品所實施的檢疫。包括宰前檢疫②屠宰檢疫。是指在宰前、宰后及屠宰過程中,對動物及動物產(chǎn)品所實施的檢疫。包括宰前檢疫和宰后檢疫兩個環(huán)節(jié)。③檢疫證明。是指檢疫機關給檢疫合格的動物、動物產(chǎn)品出具的法律書證?,F(xiàn)行農(nóng)業(yè)部統(tǒng)一監(jiān)制、發(fā)放和使用的檢疫證明包括《動物檢疫合格證明》、《動物產(chǎn)品檢疫合格證明》、《出縣境動物檢疫合格證明》、《出縣境動物產(chǎn)品檢疫合格證明》和《動物及動物產(chǎn)品運載工具消毒證明》5種。

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強化監(jiān)督檢查。中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所要加強疫苗質(zhì)量監(jiān)管工作,開展監(jiān)督抽檢,對生產(chǎn)企業(yè)實行督導檢查。各級農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門要加強對轄區(qū)內(nèi)強制免疫疫苗生產(chǎn)企業(yè)的監(jiān)督檢查,督促生產(chǎn)企業(yè)嚴格執(zhí)行獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)。實施獸藥“二維碼”管理制度,加強疫苗追蹤和全程質(zhì)量監(jiān)管,嚴厲打擊制售假劣疫苗行為。對拒不履行強制免疫義務、因免疫不到位引發(fā)動物疫情的單位和個人,要依法處理并追究責任。

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動物疫病包括動物傳染病、寄生蟲病。動物傳染病,即由病原體侵入動物體內(nèi),使動物產(chǎn)生具有一定潛伏期和臨床癥狀并具有傳播性 的動物疫病,如口蹄疫、雞瘟、牛肺疫、炭疽、布魯氏菌病、狂 犬病等。動物寄生蟲病,即由寄生蟲寄生在動物體內(nèi)或體表引起 的疾病,如豬囊蟲病、旋毛蟲病、鉤端螺旋體病、血吸蟲病、疥瞞等。根據(jù)動物疫病對養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)和人體健康的危害程度,我國還 將動物疫病分為下列三類:對人畜危害嚴重、需要采取緊急、嚴 厲的強制預防、控制、撲滅措施的為一類疫?。豢稍斐芍卮蠼?jīng)濟 損失、需要采取嚴格控制、撲滅措施,防止疫情擴散的為二類疫 病;常見多發(fā)、可能造成重大經(jīng)濟損失、需要控制和凈化的為三 類疫病。

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制定免疫計劃。各省份按照本意見要求,結合防控實際(含計劃單列市工作需求),制定本轄區(qū)的強制免疫計劃,報農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局備案,抄送中國動物疫病預防控制心,并在省級農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門門戶網(wǎng)站公開。對散養(yǎng)動物,采取春秋兩季集中免疫與定期補免相結合的方式進行,對規(guī)模養(yǎng)殖場(戶)及有條件的地方實施程序化免疫。實行“先打后補”。各省份可采用養(yǎng)殖場(戶)自行免疫、第三方服務主體免疫、政府購買服務等多種形式,推進“先打后補”工作,在2022年年底前實現(xiàn)規(guī)模養(yǎng)殖場(戶)全覆蓋,在2025年年底前逐步停止政府招標采購強制免疫疫苗。

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熱啟動 Taq 酶的應用:PCR 能夠快速特異的擴增任何已知的 DNA 片段,因此被廣泛的應用于分子生物學的各個領域。Relia 熱啟動酶因具有 5’-3’核酸外切酶活性,可用于熒光定量 PCR 反應。采用熱啟動法擴增是提高 PCR 特異性的常用方法,熱啟動酶是很好的選擇。除此之外,因其具有的高特異性高靈敏度被廣泛應用到各個方面:構建 cDNA 文庫,產(chǎn)生大量 DNA 測序,突變體分的析構建,基因分離,遺傳病診斷,法醫(yī)鑒定等。