南通市分子診斷試劑原材料廠家
發(fā)布時間:2023-04-10 01:30:24
南通市分子診斷試劑原材料廠家
全球,雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷,但國內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位。基因芯片技術(shù)將是熒光定量PCR 檢測技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對手,主要是:熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測一個或幾個目標基因,而基因芯片技術(shù)可以實現(xiàn)對大量目標基因的同時檢測。隨著人類基因組計劃的進展,基因芯片在國內(nèi)外已成為研發(fā)熱點。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化,將對熒光定量PCR 檢測產(chǎn)生較大的沖擊。不過,基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因,預(yù)計熒光定量PCR 檢測技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。

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大部分分子診斷實驗室的核心技術(shù)都主要集中在檢測特異性、相對較短的DNA或RNA片段上。該技術(shù)能診斷傳染性疾病、鑒別影響藥物代謝的特殊基因變異型或檢測與疾病有關(guān)的基因,如與癌癥有關(guān)的基因。這些檢測的核心是實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)擴增(TMA)、靶向擴增和信號擴增等類似技術(shù)的應(yīng)用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛細電泳法的凝膠法都是分子診斷實驗室的關(guān)鍵技術(shù),但他們通常還包括檢測過程中的擴增步驟。為了能順利應(yīng)用那些采用DNA和RNA來診斷疾病的檢測,分子診斷實驗室須要使用定義明確的工作流程,從而得到穩(wěn)定的、有效的結(jié)果,而當前已存在能幫助診斷實驗室實現(xiàn)每個工作流程流水化的特殊工具。

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強化監(jiān)督檢查。中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所要加強疫苗質(zhì)量監(jiān)管工作,開展監(jiān)督抽檢,對生產(chǎn)企業(yè)實行督導檢查。各級農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門要加強對轄區(qū)內(nèi)強制免疫疫苗生產(chǎn)企業(yè)的監(jiān)督檢查,督促生產(chǎn)企業(yè)嚴格執(zhí)行獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)。實施獸藥“二維碼”管理制度,加強疫苗追蹤和全程質(zhì)量監(jiān)管,嚴厲打擊制售假劣疫苗行為。對拒不履行強制免疫義務(wù)、因免疫不到位引發(fā)動物疫情的單位和個人,要依法處理并追究責任。

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在動物疫病診斷標準等技術(shù)規(guī)范中,酶聯(lián)免疫吸附試驗對試驗中加底物的反應(yīng)步驟進行規(guī)定,規(guī)定固定的時間,然后加終止液。但是,在許多酶聯(lián)免疫吸附試驗中,加底物的反應(yīng)步驟需要根據(jù)陰性、陽性對照反應(yīng)情況對反應(yīng)的時間進行調(diào)整。如當陰性與陽性對照的反應(yīng)結(jié)果出現(xiàn)后,實驗人員則可以加終止液。有關(guān)資料規(guī)定的時間可能太長或者太短,這樣會對反應(yīng)的結(jié)果產(chǎn)生影響。如果加底物的反應(yīng)時間較長,樣品則有可能呈現(xiàn)陽性,易導致誤診情況的產(chǎn)生。

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常規(guī)普通PCR常見問題:1. 優(yōu)化反應(yīng)條件,梯度摸索退火溫度,延長退火延伸時間,增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)(30-45區(qū)間為宜)。2. 對核酸模板進行純化,或使用商業(yè)化核酸提取試劑盒進行提取,增加核酸模板的上樣量。3. 優(yōu)化反應(yīng)體系(預(yù)混體系除外),改變檢測體系中的Mg2+濃度及dNTPs用量,更換體系中Buffer。4. 重新設(shè)計引物,避免引物二聚體和鏈內(nèi)二級結(jié)構(gòu),在一次稀釋引物后可分裝成多支小管,減少反復(fù)凍融次數(shù)。

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動物疫病診斷的主要內(nèi)容有:一是對血、 尿、糞等進行臨床常規(guī)化驗;二是從流行病學角度,調(diào)查研究動物疫病流行情況,主要調(diào)查動物發(fā)病時間及地點、疫病蔓延情況、疫情來源及傳播的途徑與方式等;三是從病理學方面,剖檢因忠傳染病而死亡的畜禽尸體,查看其病理變化,或者取病料進行送檢,再進一步做病理組織學方面的診斷;四是從微生物學角度,檢查、堅定從患病的畜禽病料當中分離并且培養(yǎng)出來的病原微生物,或者是進行動物接種試驗等,五是從免疫學角度,對組織或者細胞的變態(tài)反應(yīng)、細胞的免疫功能及血清學反應(yīng)等進行診斷。